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ＰＯＣ（Ｐｏｉｎｔ－ｏｆ－Ｃａｒｅ）又稱(chēng)即時(shí)檢測(cè)，是ＩＶＤ行業(yè)的一個(gè)細(xì)分領(lǐng)域，指在采樣現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行的、利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測(cè)結(jié)果的一種檢測(cè)方式。

ＰＯＣＴ技術(shù)最早始于２０世紀(jì)中期，由Ｅｄｍｏｎｄｓ以干化學(xué)制片測(cè)量血糖及尿糖，隨后由Ａｍｅｓ公司將其檢測(cè)項(xiàng)目擴(kuò)大并商業(yè)化。由于方法簡(jiǎn)便快速而得到普遍應(yīng)用。近２０年來(lái)，ＰＯＣ檢測(cè)的發(fā)展在全球范圍內(nèi)是肉眼可見(jiàn)的速度在突飛猛進(jìn)。

中國(guó)自２０１５年ＰＯＣＴ第一股上市開(kāi)始，以每年超過(guò)２０％的速度快速增長(zhǎng)，預(yù)計(jì)２０２７年整體市場(chǎng)超過(guò)２６０億元，遠(yuǎn)超全球ＰＯＣＴ行業(yè)７．４％的發(fā)展速度，已經(jīng)是我國(guó)ＩＶＤ行業(yè)增長(zhǎng)最快的細(xì)分領(lǐng)域之一。

來(lái)源：前瞻產(chǎn)業(yè)研究院

為了更好的理解ＰＯＣ檢測(cè)，為其技術(shù)的發(fā)展指明方向，已有幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)估ＰＯＣ檢測(cè)的適用性。其中包括ＷＨＯ的ＡＳＳＵＲＥＤ標(biāo)準(zhǔn)，ＦＤＡ的ＣＬＩＡ標(biāo)準(zhǔn)，以及在新冠之后提出的ＳＴＡＲＬＩＴＥ標(biāo)準(zhǔn)。

在新冠疫情期間，ＰＯＣＴ通過(guò)實(shí)際場(chǎng)景的應(yīng)用自證了其技術(shù)的成熟性和可靠性，尤其是分子ＰＯＣＴ檢測(cè)技術(shù)的廣泛運(yùn)用。

等溫?cái)U(kuò)增（如ＨＣＡ、ＭＤＡ、ＮＡＳＢＡ和ＬＡＭＰ等）在分子ＰＯＣ診斷中發(fā)揮了越來(lái)越重要的作用。等溫?cái)U(kuò)增具有與ｑＰＣＲ相似的靈敏度和特異性，但是在快速、低成本和便攜性方面具有優(yōu)勢(shì)，因此成為在資源有限環(huán)境下使用ＰＯＣ檢測(cè)的理想選擇。

近幾年來(lái)，等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的進(jìn)步，尤其是在實(shí)時(shí)檢測(cè)、多重?cái)U(kuò)增和基于芯片的檢測(cè)方面的發(fā)展，提高了等溫?cái)U(kuò)增的靈敏度和準(zhǔn)確性，可以說(shuō)是徹底改變了ＰＯＣ行業(yè)，為更快、更方便的診斷鋪平了道路。

在多種等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)中，ＬＡＭＰ是最常用的方法，它可實(shí)現(xiàn)在恒定溫度（６０－６５oＣ）下對(duì)ＤＮＡ或ＲＮＡ靶標(biāo)進(jìn)行高效、特異和快速擴(kuò)增。在相同時(shí)間內(nèi)，ＬＡＭＰ擴(kuò)增　效率比傳統(tǒng)　ＰＣＲ高１００倍。不過(guò)，ＬＡＭＰ技術(shù)也有一些限制，例如具有較高假陽(yáng)性率，引物設(shè)計(jì)復(fù)雜、重復(fù)性不太好。

另一種等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，基于核酸序列的擴(kuò)增（Ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｂａｓｅｄ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ＮＡＳＢＡ）也越來(lái)越受歡迎，它的核心優(yōu)勢(shì)是能在更低的溫度下（～４１°Ｃ）下直接擴(kuò)增ＲＮＡ，只需要使用２個(gè)特異性引物Ｐ１／２，因此在引物設(shè)計(jì)方面就沒(méi)那么復(fù)雜，更容易優(yōu)化。

與使用Ｂｓｔ酶鏈置換活性的ＬＡＭＰ擴(kuò)增不同，ＮＡＳＢＡ擴(kuò)增是依賴(lài)ＡＭＶ逆轉(zhuǎn)錄酶、ＲＮａｓｅ　Ｈ和噬菌體Ｔ７　ＲＮＡ聚合酶活性進(jìn)行的反應(yīng)。

其兩個(gè)特異性引物與目標(biāo)ＲＮＡ序列雜交，并通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄酶生成ＤＮＡ的互補(bǔ)鏈（ｃＤＮＡ），然后將其作為模板合成多個(gè)ＲＮＡ副本。新的ＲＮＡ鏈和ｃＤＮＡ模板通過(guò)變性和再變性分離并重新連接。這一過(guò)程在反轉(zhuǎn)錄（產(chǎn)生更多的ｃＤＮＡ）、ＲＮＡ合成和指數(shù)級(jí)ＲＮＡ擴(kuò)增的循環(huán)中重復(fù)進(jìn)行，可在９０分鐘內(nèi)將目標(biāo)片段擴(kuò)增１０１２倍以上。

ＮＡＳＢＡ反應(yīng)的反轉(zhuǎn)錄過(guò)程被直接合并到擴(kuò)增反應(yīng)中，因此該技術(shù)最適合分析ＲＮＡ樣品。樣品中ＤＮＡ、肝素、檸檬酸鹽、血紅蛋白、白蛋白和脂質(zhì)等的污染將不會(huì)對(duì)結(jié)果造成影響，因而適用于可能不適合其他試驗(yàn)檢測(cè)的樣品。且反應(yīng)溫度較低，因此是細(xì)菌、病毒等多種病原微生物ＰＯＣ診斷的理想選擇。